附件2：
竞赛规则
1．理论知识
（1）答题用的稿纸由现场工作人员统一发给，选手不得自带任何资料进入赛场。
（2）选手在竞赛试卷上规定位置作答，试卷其它位置不得有任何暗示或符号，否则取消成绩。
2．操作技能
（1）选手的出场顺序由抽签决定，竞赛试题由抽签决定，于赛前10分钟公布予以赛前准备。
（2）选手参加操作技能竞赛前，须按组委会指定时间熟悉竞赛场地及设备情况。
（3）竞赛过程中，选手若需休息或去洗手间，一律计算在操作时间内。竞赛时间为连续3小时
（4）如果选手提前结束竞赛，应举手向裁判员示意提前结束操作。竞赛终止时间由裁判员记录在案，选手提前结束比赛后不得再进行任何操作。
（5）提交试卷：选手提交试卷时应进行必要的清理，裁判员需在指定位置做好标记并需经选手在登记簿上签字确认，以便检验和评分。
评分标准
一、鲫鱼解剖（20分）
1、操作物品
解剖盘、解剖剪、解剖刀、解剖针
2、操作过程及评分
（1）进入实验室（2分）
进入实验室，要求着装整齐，将实验用具放置整齐，不得有声音发出。
（2）放置鲫鱼（3分）
将实验材料（鲫鱼）从水槽中拿出放置解剖盘中，鱼不得从盘中跳出，水不得溅出，摆放位置符合解剖条件（左侧向上，头部在左手位）。
（3）鲫鱼的解剖
左手握住鲫鱼头部和背部，使腹面向上。右手拿剪刀，从肛门前
（3）向监考老师说出鲫鱼的内脏名称，回答教师提出的问题。（5分）
（4）根据操作熟练程度，可酌情扣分。
二、微生物平板划线（20分）
1．操作物品
酒精灯、接种环、培养基
2．操作过程及评分
划线的形式有多种，在这次竞赛中，要求学生采用在一个平板上分成 4 个不同面积的小区域而进行划线的方法。第一区面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区是逐级稀释的过渡区，第四区则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。
（1）标记（2分）
在培养皿底面，用记号笔注明接种的菌名、接种者姓名、日期等。
（2）灭菌接种环（4分）
点燃酒精灯，右手以持笔式握持接种环，并放置火焰中烧灼灭菌，先将接种环的接种丝部分置于火焰中，待金属丝烧红并蔓延至金属端时，再直接烧灼金属环直至烧红，然后由金属环至金属杆方向快速通过火焰，随后再反方向通过火焰，如此2~3 次。然后将接种环移开火焰，待其冷却。
（3）取菌种（4）
左手持装有大肠杆菌的试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管塞，将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。将已灭菌且冷却的接种环伸入菌种管中，取一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管口再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管塞，放至原来的位置。
（4）分离划线接种细菌（四区接种法）（4分）
①在酒精灯无菌区域内，左手持琼脂平板培养基，右手持接种环，先将细菌标本涂布于培养基一角，并以此为起点进行连续不重叠划线作为第一区，其范围不能超过平板的1/4。划线时使接种环与接种平板面呈30°至 40°角，以腕力在平板表面行轻而快地来回滑动动作。
②将接种环置于火焰上烧灼灭菌，防止因细菌过多而影响后面各区的分离效果。待冷却后，转动平皿至适合操作的位置，将接种环通过第一区3~4 次，连续不重叠划线，作为第二区。
③将接种环烧灼灭菌，待冷却后，转动平皿，将接种环接第二区3~4 次，连续不重叠划线作为第三区。
④将接种环烧灼灭菌，待冷却后，转动平皿，接第三区 3~4次连续不重叠划线，划满平板其余部分，作为第四区。但划第四区时切勿重新接触第一、二区，以免将这两区中浓密的菌液带到第四区，影响单菌落的形成。
（5）培养（3）
划线完毕，盖好皿盖，倒置放入
（6）观察、记录结果（3分）
培养18~24 h 后，将培养皿取出。观察并记录琼脂平板表面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边缘、表面结构、透明度、颜色等性状，以及有无菌落溶血现象，是否有色素产生，是否有气味等。
（7）操作过程不熟练，可酌情扣1~2分
终审人：陈志宏